Чтобы увеличить успех экстракорпорального оплодотворения

1. Вспомогательное размещение

Более половины пар, использующих вспомогательные репродуктивные технологии, не беременеют, даже если эмбрион развивается. Причина, по которой беременность не наступает несмотря на оплодотворение, вероятно, связана с фазой имплантации эмбриона в матку.

После помещения эмбриона в матку происходят различные события; эмбрион продолжает делиться и расти. Когда он достигает определенного размера, он разрывает окружающую его оболочку (прозрачную зону) и оседает глубоко в ткани матки, называемой эндометрием, где продолжает расти.

Принято считать, что важнейшая причина, по которой беременность не наступает, заключается в том, что эмбрион не может выбраться наружу, разорвав эту оболочку, и поэтому не может прикрепиться к стенке матки. Чтобы решить эту проблему, перед процессом переноса в этой оболочке, окружающей эмбрион, с помощью химических или механических методов проделывают небольшое отверстие, что позволяет эмбриону разорвать эту оболочку и оседать на стенке матки. Научные исследования показывают, что при использовании этого метода наблюдается заметное увеличение частоты наступления беременности. Кратко этот прием применяется следующим образом: сначала эмбрион фиксируют путем отсасывания его из стенки с помощью микроскопической трубки, а затем в двух точках делают отверстие, проходя по касательной через стенку эмбриона микроскопической иглой. Пока эмбрион продолжает расти в матке, он может проколоть мембрану в этих слабых местах.

2. Совместное культивирование эндометрия
В этом методе кусочек матки, взятый из матки после овуляции за месяц до лечения, искусственно обрабатывается культурой клеток в лабораторных условиях. На этот слой помещают эмбрионы и контролируют их рост. Совместное культивирование — это метод, который был внедрен особенно в начале 1990-х годов, поскольку среда культивирования эмбрионов не поддерживала эмбрионы до поздних стадий развития, и сегодня он мало используется за пределами исследований. Существует исследование, показывающее, что частота наступления беременности увеличивается при использовании совместных культур у пар с повторяющимися неудачными попытками экстракорпорального оплодотворения (Spandorfer 2003). На сегодняшний день подобные результаты не были опубликованы другими исследователями. Наиболее важным недостатком исследования является то, что так называемые рандомизированные группы не были выбраны случайным образом. Важнейшей причиной потери популярности сокультуры является применяемый в последние годы метод улучшения развития эмбрионов на 5-6 стадиях. Причиной этого является появление сменяющих друг друга культурных сред, поддерживающих его до сегодняшнего дня. В этих средах скорость достижения эмбрионами стадии бластоцисты не отличается или даже выше, чем при совместном культивировании. Мы не используем сокультуры как рутинно, так и в парах с неудачными попытками, так как их эффективность не доказана.

3. Склеивание эмбрионов
Существуют исследования, показывающие, что вероятность наступления беременности увеличивается при использовании клея, называемого эмбриональным клеем, особенно у пожилых женщин и пар с повторными неудачными попытками экстракорпорального оплодотворения. В двух исследованиях, которые мы провели в нашей собственной клинике, мы обнаружили, что приклеивание эмбрионов было полезным у отдельных пар (возраст женщины старше 39 лет и повторные неудачные попытки экстракорпорального оплодотворения). Мы рекомендуем его использование у этой группы пациентов. Однако парам не следует воспринимать это как чудо.

4. Культура бластоцисты
В последнее время с использованием разработанных систем сред жизнеспособность эмбрионов была дополнительно увеличена в лабораторных условиях, и, соответственно, в центрах экстракорпорального оплодотворения стали обычным явлением переносы на 5-й или 6-й день, которые обеспечивают более высокие показатели наступления беременности. Это называется переносом бластоцисты. Последняя стадия, которой достигает эмбрион перед прикреплением к утробе матери, называется стадией бластоцисты. Были получены лучшие результаты по сравнению с переносами на второй-третий день.

Преимущества переноса бластоцисты:

• Возможность выбора эмбрионов с лучшим потенциалом развития.
• Снижение возможности многоплодной беременности за счет переноса меньшего количества эмбрионов с высокой жизнеспособностью.
• Лучшее наблюдение за развитием эмбриона
• Возможность возврата эмбрионов на стадии бластоцисты, когда они обладают наибольшим потенциалом развития.
• Уметь выполнять биопсию трофэктодермы (внутренних клеточных слоев бластоцисты) в центрах, занимающихся преимплантационной генетикой, и устранять этические проблемы, поскольку эта ткань не является эмбриональной.
• Это открывает возможности для методов исследования жизнеспособности эмбрионов.

  
  5. Преимплантационная генетическая диагностика.
  Преимплантационная генетическая диагностика (ПГД) — это новый метод генетической диагностики, который позволяет парам с генетическими заболеваниями в их семьях или интерстициальными семьями, которые не ответили на лечение, родить здорового ребенка с помощью метода экстракорпорального оплодотворения. При этом методе эмбрионы, полученные от пар, исследуются один за другим, генетически здоровые эмбрионы отделяются от аномальных эмбрионов, а эмбрионы, признанные генетически нормальными, передаются будущей матери. Таким образом, беременность контролируется с самого начала для пар, у которых высокий риск рождения ребенка с генетическим заболеванием. Одной из основных причин отрицательных результатов ЭКО являются выкидыши по причине хромосомной аномалии. По этой причине ПГТ рекомендуется будущим матерям старшего возраста, особенно из-за высокой частоты хромосомных аномалий, обнаруживаемых в ооцитах пожилых пациенток ЭКО. Кроме того, с помощью ПГТ также можно провести предбеременный анализ генетических заболеваний, таких как талассемия и серповидно-клеточная анемия, которые часто наблюдаются в нашей стране. Развитие генетических методов и расширение доступа к информации облегчили парам обращение в медицинские центры по поводу ПГТ и других методов пренатальной диагностики. ЭКО, основной целью которого является воссоединение семей со здоровыми детьми, сделало еще один шаг к успеху с применением преимплантационной генетической диагностики.

  6. Замораживание эмбрионов
  Замораживание человеческих гамет и эмбрионов имеет большое значение в практике экстракорпорального оплодотворения. Общий подход к минимизации риска многоплодной беременности при экстракорпоральном оплодотворении заключается в переносе максимум трех эмбрионов. В этом случае первый вопрос, который приходит на ум – как оценить полученные лишние эмбрионы. Замораживание полученных таким образом лишних эмбрионов дает пациенту как экономическую, так и психологическую выгоду. Кроме того, при переносе замороженных эмбрионов пациенту не требуется никакого лечения. Замораживание эмбрионов также можно рассматривать как процедуру, повышающую шансы на успех при экстракорпоральном оплодотворении.

  Процесс замораживания и оттаивания эмбрионов включает охлаждение эмбрионов после уравновешивания их химическими веществами (криопротекторами) и хранение в жидком азоте при температуре -196°С. После оттаивания их извлекают из криопротекторной среды и помещают в специальные культуральные среды для дальнейшего развития. Обе процедуры необходимо выполнять очень осторожно. При рутинном экстракорпоральном оплодотворении и микроинъекциях частота наступления беременности при замораживании эмбрионов варьируется в пределах -25. Если беременность наступила в том же цикле, а оставшиеся эмбрионы заморожены, то на этот раз вероятность наступления беременности такая же. Эмбрионы, замороженные после получения разрешения от пар, могут храниться в жидком азоте в течение трех лет согласно закону, вступившему в силу в Турции в 1997 году.

  7. Снятие трубок
  В некоторых случаях при закупорке труб в них скапливается жидкость (гидросальпинкс), что снижает успешность экстракорпорального оплодотворения до нулевого уровня. Если при УЗИ обнаруживается, что внутренняя часть труб заполнена жидкостью, удаление труб с помощью лапароскопической техники перед экстракорпоральным оплодотворением позволяет паре попытаться забеременеть, не уменьшая их шансы на беременность.

  8. Микродиссекция TESE
  Мешок, содержащий яички, и оболочка, называемая белочной оболочкой, окружающая каждое яичко, вскрывают с помощью небольшого разреза. Ткань яичка исследуют под микроскопом и берут образцы с больших площадей. Завершается процесс сшиванием вырезанных участков. Имеются публикации, свидетельствующие о том, что этот метод вызывает меньшее повреждение ткани яичка. При хирургических методах получения спермы сперматозоиды можно обнаружить в 100% случаев обструктивной азооспермии и в 100% случаев необструктивной азооспермии. При обструктивной азооспермии показатели жизнеспособности сперматозоидов после замораживания и оттаивания, а также вероятность наступления беременности с использованием этих сперматозоидов довольно хорошие. Однако замораживание и повторное использование спермы, полученной при необструктивной азооспермии, является спорным вопросом. Значительная часть спермы, полученной от этих пациентов, имеет структурные дефекты и может не выдержать стресс процесса замораживания и оттаивания. Однако, если сперматозоиды не могут быть обнаружены в ходе последующих процедур, можно рекомендовать заморозить и очень избирательно хранить подходящие сперматозоиды. Мы считаем, что использование максимально свежей спермы увеличивает успех в этой группе.

  В литературе описаны случаи обструктивной азооспермии у пациентов, перенесших до семи процедур, и сперматозоиды были получены при каждой из этих процедур. В случаях необструктивной азооспермии сообщалось о пациентах, перенесших TESE до 6 раз и получивших сперму, при условии, что сперматозоиды были обнаружены в предыдущих TESE. Показатели наступления беременности, полученные при повторных применениях TESE, не отличаются от показателей наступления беременности, полученных при первом применении. Сообщалось, что 25% пациентов с необструктивной азооспермией, у которых зрелые сперматозоиды не были обнаружены при первом TESE, были обнаружены при втором применении.