Вспомогательные репродуктивные технологии (ВРТ), или вспомогательные репродуктивные технологии (ВРТ) по-английски, — это процедуры, основанные на логике извлечения яйцеклеток, образующихся в женском организме, из организма с помощью специальных игл, оплодотворения их спермой мужчины в лабораторных условиях и переноса полученного эмбриона или эмбрионов в женскую матку.
Благодаря использованию вспомогательных репродуктивных технологий сегодня многие пары могут иметь детей. К вспомогательным репродуктивным методам в современной медицине относятся классическое экстракорпоральное оплодотворение (ЭКО) и микроинъекция, также известная как интрацитоплазматическая инъекция сперматозоида (ИКСИ). Вспомогательные репродуктивные технологии в современной медицине. классическое экстракорпоральное оплодотворение или экстракорпоральное оплодотворение (ЭКО) и микроинъекция или иначе известный какинтрацитоплазматическая инъекция сперматозоида (ИКСИ) есть.
Единственная разница между экстракорпоральным оплодотворением и микроинъекцией заключается в способе оплодотворения.
Микроинъекция, или сокращенно ИКСИ, является одним из последних достижений в области вспомогательных репродуктивных технологий. При этом методе сперма попадает непосредственно в яйцеклетку. С внедрением ИКСИ возможности лечения экстракорпорального оплодотворения и особенно бесплодия, вызванного мужскими проблемами, значительно возросли и открылись новые горизонты.
ТЕСЕ И ТЕСА Названные методы используются в случаях, когда в образце спермы нет сперматозоидов или когда сперматозоиды вырабатываются, но не могут быть изгнаны. Например, в тех случаях, когда протоки мужчины заблокированы и он не может эякулировать большое количество спермы в яичке, из яичка мужчины берут ткань с помощью иглы, в ней обнаруживают сперматозоиды и полученной спермой достигают оплодотворения. Эта процедура называется аспирацией спермы яичек, сокращенно TESA. Или образец кусочка/ткани берется непосредственно из яичка и из этой ткани получается сперма, что называется экстракцией спермы из яичка (TESE).
Если раньше процедура TESE включала грубое удаление одного или двух кусочков ткани из яичка, то теперь процедура выполняется с использованием операционного микроскопа. В этом процессе микроТЭСЭСказано. По сравнению с классическим применением TESE, вероятность обнаружения спермы выше, а вероятность повреждения яичка ниже. При аспирации спермы яичка (TESA) сперму получают путем аспирации, то есть вытягивания ее под отрицательным давлением у пациентов с закупоркой протоков. Во всех случаях экстракорпорального оплодотворения общей целью различных методов лечения овуляции является получение большого количества яйцеклеток. Это лечение включает контролируемую стимуляцию яичников.
В каких ситуациях проводится экстракорпоральное оплодотворение? 
• У женщин с закупоркой маточных каналов (труб)
— В случаях, когда функции спермы серьезно нарушены
• Женщины с обширными спайками в брюшной полости из-за эндометриоза и не могут забеременеть при лечении.
• Иммунологическое (относительно иммунной системы) бесплодие.
• При некоторых гормональных расстройствах.
• В случаях, когда беременность не может быть достигнута другими методами лечения.
• Бесплодие, причину которого невозможно объяснить с помощью проведенных исследований.
• Для получения здорового ребенка путем диагностики некоторых наследственных заболеваний на стадии эмбриона (совместно с методами досрочной генетической диагностики).
• С целью отбора здоровых эмбрионов методом генетической диагностики у женщин с привычным невынашиванием беременности.
• Если беременность не наступает, несмотря на многократное применение метода осеменения.
КАКИЕ ЭТАПЫ ЭКО?
Развитие яиц
Для обеспечения развития яйцеклеток используются различные препараты стимулирующих гормонов. В классической практике в период подготовки для контроля развития яйцеклеток с помощью наружных гормональных препаратов примерно на две недели используются супрессивные гормоны. Эти гормоны можно использовать в виде подкожной инъекции или назального спрея, который человек может применять самостоятельно. После супрессивного лечения пациентке, у которой в течение 10–14 дней начинается менструация, проводятся анализы крови и УЗИ, а также назначаются гормональные препараты, стимулирующие развитие яйцеклеток. Эти подавляющие инъекции назначаются человеку для предотвращения дефектов, которые могут возникнуть в нервной системе плода при наступлении беременности. фолиевая кислота поддержка также предоставляется. Кроме того, обоим партнерам проводится кратковременное лечение антибиотиками, чтобы уничтожить некоторые возможные микробы, которые могут отрицательно повлиять на лечение. Назначение стимулирующих игл, используемых при вспомогательных репродуктивных технологиях. много яиц, а затем много эмбрионов для увеличения шансов на беременность. Для каждой пациентки определяется отдельная схема лечения и дозы в зависимости от возраста женщины, овариального резерва, показателей гормонов крови и соотношения роста и веса.
Примеры применяемых протоколов:
КРАТКИЙ ПРОТОКОЛ Применение ГнРГ начинают в первый день менструального кровотечения и продолжают до конца лечения (дня раскалывающей инъекции).
УЛЬТРА КРАТКИЙ ПРОТОКОЛ ГнРГ начинают в первый день менструального кровотечения и прекращают через три дня. Лечение продолжают чМГ или ФСГ.
ПРОТОКОЛ АНТАГОНИСТОВ Стимулирующие препараты начинают в первые дни менструального кровотечения, а через несколько дней лечение продолжают, добавляя препараты, называемые антагонистами, которые предотвращают преждевременное растрескивание.
ДЛИННЫЙ ПРОТОКОЛ Введение ГнРГ начинают примерно на двадцать первый день предыдущей менструации. На третий день следующего менструального кровотечения по анализу крови определяют, есть супрессия или нет. Если уровень эстрогена в крови снизился, это означает, что подавление достигнуто. В этом случае начинают стимуляционную терапию, но введение ГнРГ не прекращают. Это продолжается до того дня, когда будет сделан решающий укол.
Какой протокол подойдет вам и какая доза препарата будет использована, решается на первом осмотре. После начала приема стимулирующих препаратов УЗИ и анализы кровиБудущая мама находится под наблюдением. Хотя вначале это встречается реже, иногда это происходит после того, как развитие яиц достигает определенного уровня. ежедневные проверки должен. По мере последующего наблюдения вносятся соответствующие изменения в дозы препарата. Развитие яиц в среднем занимает 10-12 дней. Когда яйца достигают определенного размера, треснувшая игла Делается последняя инъекция, так называемое яйцо, и примерно через 36 часов яйца извлекаются из организма с помощью специальных игл до того, как они вылупятся, и доставляются в лабораторию. Следует знать, что при экстракорпоральном оплодотворении, полученном с применением этих препаратов, развития ребенка-инвалида, предположительно вызванного применением препаратов, не наблюдалось.
Содержит ли каждый фолликул в яичниках яйцеклетку?
Нет. Однако если фолликулов много, сосчитать их все становится сложно. В этом случае можно получить больше яйцеклеток, чем мы видим на УЗИ. Однако, к сожалению, в тех случаях, когда на УЗИ присутствует только один или два фолликула, яйцеклетки получить невозможно. Средняя норма оплодотворения составляет 70-80%. Хотя у некоторых пар уровень оплодотворения выше, к сожалению, оплодотворение вообще случается редко. В этом случае пару информируют о ситуации и сделка отменяется.
Процесс сбора яиц
Сбор яйцеклеток (OPU — забор ооцитов) — это процедура, выполняемая вагинально с помощью иглы, добавленной к ультразвуковому датчику (УЗГ), через 36 часов после применения иглы для разламывания яйцеклеток. Когда будут собраны яйцеклетки, решается на основании уровня гормона эстрадиола в крови и диаметра фолликула. В зависимости от желания пациента может быть применена местная или общая анестезия. Если требуется общая анестезия, пациент должен быть проинформирован заранее, так как ему/ей не придется ничего есть или пить со вчерашнего вечера. Яичники достигаются с помощью иглы при вагинальном УЗИ, каждый фолликул аспирируется один за другим и помещается в стерильные пробирки. Пробирки передаются в эмбриологическую лабораторию и исследуются на наличие яйцеклеток. Если при первой аспирации из фолликула яйцеклетка не обнаружена, фолликул промывают. После того, как яйцеклетка найдена, она переходит к другим фолликулам. Процесс сбора яйцеклеток занимает примерно 15-20 минут и представляет собой процедуру, которую пациенты могут переносить и которая не вызывает серьезной боли. Поскольку иногда могут возникать боли в паху и животе, прием обезболивающих препаратов типа парацетамола не причинит вреда. Одна из ситуаций, с которой можно столкнуться во время процедуры, — это небольшое кровотечение в месте входа иглы, а другая — инфекция. Кровотечение устраняют простой тампонадой. Инфекция контролируется лечением антибиотиками. Однако этот показатель составляет менее 1%.
Фолликулярная жидкость, подаваемая в эмбриологическую лабораторию в пробирке, оценивается эмбриологом под микроскопом и сообщается врачу. Яйцеклетку, обнаруженную в фолликулярной жидкости, извлекают с помощью пипетки, промывают специальными средами и помещают в другую чашку Петри. Перед началом процесса микроинъекции его выдерживают в инкубаторе в течение 2 часов.
При принятии решения о том, будет ли применено экстракорпоральное оплодотворение (ЭКО) или микроинъекция к собранным яйцеклеткам, оцениваются возраст пациентки, количество яйцеклеток, качество, статус спермы (количество, движение и форма), были ли предыдущие попытки, а также будет ли применяться ПГД или нет. Даже если решение о применении экстракорпорального оплодотворения принято, часть яйцеклеток обычно вводят микроинъекциями. Это необходимо для предотвращения неожиданного отказа оплодотворения.
Экстракорпоральное оплодотворение (ЭКО) Если решение о применении принято, через 4 часа после сбора яйцеклеток яйцеклетки и промытую сперму сравнивают по каплям в пробирке или в культуральной чашке Петри. Этот процесс осуществляется путем расчета количества сперматозоидов на яйцеклетку. В этом процессе сперма сама осуществляет оплодотворение. Контроль оплодотворения проводят через 18-20 часов.
Когда параметры спермы ниже нормы, напр. В тех случаях, когда их количество низкое, подвижность низкая или нормальная морфология ниже 4%, способность спермы оплодотворять яйцеклетки очень низкая. Даже в более запущенных случаях, которые мы называем тяжелым мужским бесплодием, сперма не может оплодотворить яйцеклетку. В этом случае следует отдать предпочтение микроинъекциям. Микроинъекция также подходит в тех случаях, когда количество яиц мало или качество яиц низкое. Микроинъекцию даже предпочитают пациентам, у которых качество спермы и яйцеклеток хорошее, но при предыдущих применениях наблюдался низкий уровень оплодотворения.
Яйца, подлежащие микроинъекции, сначала подвергаются механическим и ферментативным процессам и очищаются от окружающих клеток, называемых кумулюсами. Оценивают зрелость очищенных яиц. Яйцо под названием Метафаза II — это зрелая яйцеклетка, к которой мы будем применять микроинъекцию. Поскольку яйцеклетка метафазы I еще не полностью созрела, микроинъекцию выполнить невозможно. Яйцо профазы-I представляет собой незрелую яйцеклетку с зародышевым пузырьком. Поэтому микроинъекцию проводить нельзя. Если яйца Метафазы-I развиваются в течение дня и становятся Метафазой-II, проводят микроинъекцию. Яйца также оцениваются эмбриологом с точки зрения цитоплазмы.
Микроинъекция проводится под микроскопом, который мы называем микроманипулятором. Используются 2 стеклянные пипетки, подготовленные под определенными углами. Одна из них — это пипетка-держатель, фиксирующая яйцеклетку, а другая — это инъекционная пипетка, которую мы вводим в яйцеклетку после захвата сперматозоида и его иммобилизации. Здесь процент оплодотворения выше, чем при методе ЭКО, поскольку сперма выбрасывается непосредственно в яйцеклетку.
После завершения процесса яйца переносят на новую среду и помещают в инкубатор. Контроль оплодотворения проводят через 18-20 часов. При проверке оплодотворения предполагается, что будет 2 пронуклеуса (ядра), одно из яйцеклетки, а другое из сперматозоида. Каждое яйцо оценивается индивидуально и отмечаются все замеченные особенности. После очистки яйцеклеток каждый оцениваемый ооцит отслеживается шаг за шагом до тех пор, пока он не будет перенесен.
Естественные потребности эмбриона в питании и источник, из которого он эту потребность удовлетворяет, со временем меняются. Для достижения этого в среде вне организма в разные периоды развития используются разные среды.
Перенос эмбрионов:
У эмбрионов, у которых проверяют оплодотворение, проверяют, есть ли деление на 2-й день. Если деление произошло, качество эмбриона оценивают по количеству в нем клеток (бластомеров), равенству бластомеров, скорости фрагментации и некоторым другим параметрам. Перенос эмбрионов можно осуществить в любой день со 2-го по 5-й день. Дата переноса определяется с учетом качества эмбрионов, количества развивающихся эмбрионов, возраста пациента, а также наличия или отсутствия генетического диагноза. В нашем центре перевод обычно осуществляется на 3-й день. Однако в тех случаях, когда качество эмбрионов хорошее, количество эмбрионов велико, а возраст пациентки соответствующий, мы предпочитаем перенести эмбрион на более позднюю стадию, а именно на стадию бластоцисты, на 5-й день, чтобы предотвратить многоплодную беременность. Во время транспортировки пациентку укладывают в положение для осмотра, а затем выделения, называемые слизью, во влагалище и шейке матки очищаются стерильными культуральными жидкостями. Лучшие эмбрионы отбираются и помещаются в матку матери с помощью катетера-переносчика под контролем УЗИ. Эта процедура является краткосрочной и безболезненной процедурой. Дается информация о состоянии эмбрионов, после непродолжительного отдыха дается информация о лекарствах и пациентка отправляется домой.
Вспомогательный хетчинг:
Вокруг эмбриона имеется оболочка, подобная оболочке, которая защищает его, которую мы называем zona pellucida. В ходе естественного развития, когда эмбрион достигает определенных размеров, эта оболочка раскрывается (вылупляется) и эмбрион прикрепляется к внутренней стенке матки. Иногда эта мембрана может быть толстой. В этом случае эмбриону становится трудно прикрепиться к внутренней стенке матки. Чтобы снизить этот риск, пеллюцидную зону на определенном участке истончают. Этот процесс называется вспомогательным хетчингом. Могут использоваться механические, химические или лазерные методы. В нашем центре для филировки применяется лазерный метод.
Замораживание эмбрионов:
Если помимо перенесенных эмбрионов имеется много эмбрионов высокого качества, принадлежащих пациенту, их можно заморозить. Путем размораживания и переноса замороженных эмбрионов для последующего применения женщина не нуждается в повторном лечении. На этом этапе пациентке дают только препараты, подготавливающие внутреннюю часть матки. Это дает как психологические, так и экономические преимущества. Эмбрионы, которые решено заморозить, постепенно балансируются химическими веществами, называемыми криопротекторами, чтобы предотвратить повреждение во время процессов замораживания и оттаивания. Для замораживания эмбрионов можно применить два метода.
1) Медленное замораживание
2)Быстрая заморозка (витрификация)
После заморозки эмбрионы хранят в жидком азоте при температуре -196°С до размораживания. Поскольку кристаллы льда, которые могут образоваться из-за жидкого содержимого эмбриона при охлаждении эмбрионов до температуры -196 градусов Цельсия, могут повредить целостность эмбриона, процесс охлаждения проводится постепенно с использованием защитных химикатов в технике медленного замораживания. При витрификации создается стеклообразная или стекловидная структура, в которой кристаллы льда вообще не образуются, а клетки замораживают, погружая их непосредственно в жидкий азот. При размораживании замороженных эмбрионов применяется обратный процесс с использованием специальных защитных химикатов. Если наблюдается, что размороженные эмбрионы продолжают свою жизнеспособность и растут, их переносят. Эмбрионы могут быть повреждены во время процессов замораживания и оттаивания, а не во время их хранения в жидком азоте.