Les techniques de procréation assistée (ART), ou techniques de procréation assistée (ART) en anglais, sont des procédures basées sur la logique consistant à extraire du corps les ovules produits dans le corps féminin à l'aide d'aiguilles spéciales, à les féconder avec le sperme de l'homme dans un environnement de laboratoire et à transférer le ou les embryons résultants dans l'utérus féminin.
Grâce aux techniques de procréation assistée, de nombreux couples peuvent aujourd’hui avoir des bébés. Les techniques de procréation assistée en médecine moderne sont la fécondation in vitro (FIV) classique et la micro-injection, également connue sous le nom d'injection intracytoplasmique de spermatozoïdes (ICSI). Techniques de procréation assistée en médecine moderne fécondation in vitro classique ou fécondation in vitro (FIV) et microinjection ou autrement connu sous le nominjection intracytoplasmique de spermatozoïdes (ICSI) est.
La seule différence entre la fécondation in vitro et la microinjection réside dans le mode de fécondation.
La microinjection, ou ICSI en abrégé, est l'une des dernières avancées en matière de techniques de procréation assistée. Avec cette méthode, les spermatozoïdes pénètrent directement dans l’ovule. Avec l'introduction de l'ICSI, les chances de traiter la fécondation in vitro et surtout l'infertilité due à des problèmes masculins ont considérablement augmenté et de nouveaux horizons se sont ouverts.
TESE ET TESA Les méthodes appelées sont des techniques utilisées dans les cas où il n'y a pas de spermatozoïdes dans l'échantillon de sperme ou lorsque des spermatozoïdes sont produits mais ne peuvent pas être expulsés. Par exemple, dans les cas où les conduits de l'homme sont obstrués et qu'il ne peut pas éjaculer la grande quantité de sperme contenue dans son testicule, du tissu est prélevé du testicule de l'homme avec une aiguille, des spermatozoïdes s'y trouvent et la fécondation est réalisée avec le sperme obtenu. Cette procédure est appelée aspiration de spermatozoïdes testiculaires, TESA en abrégé. Ou bien, un échantillon de morceau/tissu est prélevé directement du testicule et le sperme est obtenu à partir de ce tissu, ce qui est appelé extraction de sperme testiculaire (TESE).
Alors que la procédure TESE impliquait auparavant de retirer grossièrement un ou deux morceaux de tissu du testicule, la procédure est désormais réalisée à l’aide d’un microscope opératoire. Dans ce processus microTESEC'est dit. Par rapport à l’application TESE classique, les chances de trouver des spermatozoïdes sont plus élevées et la possibilité d’endommager le testicule est plus faible. Dans l'aspiration testiculaire de spermatozoïdes (TESA), les spermatozoïdes sont obtenus par aspiration, c'est-à-dire en les tirant avec une pression négative, chez les patients dont les conduits sont obstrués. Dans toutes les applications de fécondation in vitro, l’objectif commun des différents traitements d’ovulation utilisés est de produire un grand nombre d’ovules. Ce traitement comprend une stimulation ovarienne contrôlée.
Dans quelles situations les applications de fécondation in vitro sont-elles effectuées ? 
• Chez les femmes dont les canaux utérins (trompes) sont bloqués
• Dans les cas où les fonctions des spermatozoïdes sont gravement altérées
• Les femmes qui présentent des adhérences étendues dans l'abdomen en raison de l'endométriose et qui ne peuvent pas obtenir de grossesse avec le traitement.
• Infertilité immunologique (concernant le système immunitaire)
• Dans certains troubles hormonaux
• Dans les cas où une grossesse ne peut pas être obtenue avec d'autres méthodes de traitement
• Infertilité dont la cause ne peut être expliquée par les tests effectués
• Afin d'obtenir un bébé en bonne santé en diagnostiquant certaines maladies héréditaires au stade embryonnaire (associé à des méthodes de diagnostic génétique prématuré).
• Afin de sélectionner des embryons sains par méthode de diagnostic génétique chez les femmes présentant des fausses couches à répétition.
• Si une grossesse ne peut être obtenue malgré l'application répétée de la méthode d'insémination.
QUELLES SONT LES ÉTAPES DE LA FIV ?
Développement des œufs
Divers médicaments hormonaux stimulants sont utilisés pour assurer le développement des œufs. Dans la pratique classique, pendant la période de préparation visant à contrôler le développement des ovules avec des médicaments hormonaux administrés de manière externe, environ pendant deux semaines des hormones suppressives sont utilisées. Ces hormones peuvent être utilisées sous forme d’injection sous-cutanée ou de spray nasal que la personne peut appliquer elle-même. Après un traitement suppressif, la patiente qui a ses règles dans les 10 à 14 jours est évaluée par des analyses de sang et une échographie, et des médicaments hormonaux qui stimuleront le développement des ovules sont instaurés. Ces injections suppressives sont administrées à la personne afin de prévenir les anomalies pouvant survenir dans le système nerveux du fœtus en cas de grossesse. acide folique un soutien est également fourni. De plus, les deux partenaires reçoivent un traitement antibiotique à court terme afin d’éliminer certains éventuels microbes susceptibles d’affecter négativement le traitement. Objectif des aiguilles stimulantes utilisées dans les techniques de procréation médicalement assistée beaucoup d'ovules et puis beaucoup d'embryons pour augmenter les chances de grossesse. Un schéma thérapeutique et posologique distinct est déterminé pour chaque patiente, en fonction de l'âge de la femme, de la réserve ovarienne, des valeurs hormonales dans le sang et du rapport taille/poids.
Exemples de protocoles appliqués :
PROTOCOLE COURT L'application de GnRHa commence le premier jour des saignements menstruels et se poursuit jusqu'à la fin du traitement (le jour du tir de crack).
PROTOCOLE ULTRA COURT La GnRHa est démarrée le premier jour des saignements menstruels et arrêtée après trois jours. Le traitement est poursuivi par hMG ou FSH.
PROTOCOLE ANTAGONISTE Les médicaments stimulants sont instaurés dans les premiers jours des saignements menstruels et, quelques jours plus tard, le traitement est poursuivi en ajoutant des médicaments appelés antagonistes qui préviennent les gerçures prématurées.
PROTOCOLE LONG L'administration de GnRHa commence approximativement le vingt et unième jour de la période précédente. Le troisième jour des saignements menstruels suivants, une analyse de sang détermine s'il y a suppression ou non. Si le taux sanguin d’œstrogènes a diminué, cela signifie que la suppression a été obtenue. Dans ce cas, le traitement de stimulation est démarré, mais l’administration de GnRHa n’est pas interrompue. Cela continue jusqu’au jour où le coup de poing est donné.
Le protocole qui vous convient et la dose de médicament à utiliser sont décidés lors du premier examen. Après le début d’un traitement stimulant échographie et analyses de sangLa future maman est suivie. Bien que cela soit moins fréquent au début, cela survient parfois après que le développement des œufs ait atteint un certain niveau. contrôles quotidiens doit. Des modifications appropriées sont apportées aux doses de médicaments en fonction des suivis. Le développement des œufs prend en moyenne 10 à 12 jours. Lorsque les œufs atteignent une certaine taille, aiguille qui craque La dernière injection, appelée œuf, est appliquée et environ 36 heures plus tard, les œufs sont retirés du corps à l'aide d'aiguilles spéciales avant d'éclore et sont livrés au laboratoire. Il faut savoir que dans les grossesses de fécondation in vitro obtenues avec l'utilisation de ces médicaments, le développement d'un bébé handicapé, que l'on pense dû aux médicaments, n'a pas été observé.
Chaque follicule des ovaires contient-il un ovule ?
Non. Cependant, s’il y a beaucoup de follicules, il devient difficile de tous les compter. Dans ce cas, plus d’ovules peuvent être obtenus que ce que l’on voit à l’échographie. Cependant, malheureusement, dans les cas où seulement un ou deux follicules sont présents à l’échographie, il se peut que les ovules ne soient pas obtenus. Le taux de fécondation moyen est de 70 à 80 %. Même si certains couples ont un taux de fécondation plus élevé, il est malheureusement rare qu’il y ait une fécondation. Dans ce cas, le couple est informé de la situation et la transaction est annulée.
Processus de collecte des œufs
Le prélèvement d'ovules (OPU - Oocyte pick up) est une procédure réalisée par voie vaginale à l'aide d'une aiguille ajoutée à la sonde d'échographie (USG), à la 36ème heure suivant l'application de l'aiguille de craquage d'ovules. On décide du moment où les ovules seront collectés en examinant le niveau d’hormone estradiol dans le sang et le diamètre des follicules. Selon le souhait du patient, une anesthésie locale ou générale peut être appliquée. Si une anesthésie générale est demandée, le patient doit en être informé au préalable car il n'aura rien à manger ni à boire depuis la veille au soir. Les ovaires sont atteints à l'aide d'une aiguille sous USG vaginale, et chaque follicule est aspiré un à un et introduit dans des tubes stériles. Les tubes sont remis au laboratoire d'embryologie et la présence d'ovules est recherchée. Si aucun ovule n’est trouvé lors de la première aspiration du follicule, le follicule est lavé. Une fois l’ovule trouvé, il passe à d’autres follicules. Le processus de collecte des ovules prend environ 15 à 20 minutes et constitue une procédure qui peut être tolérée par les patients et qui ne provoque pas de douleur grave. Étant donné que des douleurs à l'aine et à l'abdomen peuvent parfois survenir, il n'y a aucun mal à prendre des analgésiques de type paracétamol. L’une des situations pouvant survenir au cours de la procédure est un petit saignement pouvant survenir à l’endroit où l’aiguille entre, et l’autre est une infection. Le saignement est éliminé par simple tamponnade. L'infection est contrôlée par un traitement antibiotique. Ce taux est cependant inférieur à 1 %.
Le liquide folliculaire donné au laboratoire d'embryologie dans un tube est évalué au microscope par l'embryologiste et le médecin en est informé. L'ovule visible dans le liquide folliculaire est retiré à l'aide d'une pipette, lavé dans un milieu spécial et placé dans une autre boîte de Pétri. Avant de démarrer le processus de microinjection, il est conservé à l'incubateur pendant 2 heures.
Au moment de décider si la fécondation in vitro (FIV) ou la microinjection sera appliquée aux ovules collectés, l'âge de la patiente, le nombre d'ovules, la qualité, l'état des spermatozoïdes (nombre, mouvement et forme), s'il y a eu des tentatives antérieures et si le DPI sera appliqué ou non sont évalués. Même si la décision de recourir à la fécondation in vitro est prise, certains ovules sont généralement micro-injectés. Ceci afin d’éviter un échec inattendu de la fertilisation.
Fécondation In Vitro (FIV) Si l'application est décidée, 4 heures après le prélèvement des ovules, les ovules et le sperme lavé sont comparés en gouttes dans un tube ou dans une boîte de Pétri de culture. Ce processus se fait en calculant le nombre de spermatozoïdes par ovule. Dans ce processus, le sperme réalise lui-même la fécondation. Le contrôle de la fertilisation est effectué après 18 à 20 heures.
Lorsque les paramètres du sperme sont inférieurs aux limites normales, par ex. Dans les cas où le nombre est faible, la motilité est faible ou la morphologie normale est inférieure à 4 %, la capacité des spermatozoïdes à féconder les ovules est très faible. Même dans les cas plus avancés, que nous appelons infertilité masculine sévère, les spermatozoïdes ne peuvent pas féconder eux-mêmes l’ovule. Dans ce cas, la microinjection est à privilégier. La microinjection convient également dans les cas où le nombre d’œufs est faible ou la qualité des œufs est faible. La microinjection est même privilégiée chez les patients dont la qualité des spermatozoïdes et des ovules est bonne mais un faible taux de fécondation a été observé dans des applications antérieures.
Les œufs à micro-injecter sont d'abord soumis à des processus mécaniques et enzymatiques et nettoyés des cellules environnantes appelées cumulus. La maturité des œufs nettoyés est évaluée. L’œuf appelé Metaphase II est l’œuf mature auquel nous appliquerons la microinjection. Étant donné que l’ovule en métaphase I n’est pas encore complètement mature, la micro-injection ne peut pas être réalisée. L'œuf Prophase-I est un œuf immature avec une vésicule germinale. La microinjection ne peut donc pas être réalisée. Si les œufs en métaphase-I se développent pendant la journée et deviennent en métaphase-II, une micro-injection est réalisée. Les œufs sont également évalués par l'embryologiste d'un point de vue cytoplasmique.
La microinjection est réalisée sous un microscope, que nous appelons micromanipulateur. 2 pipettes en verre préparées sous certains angles sont utilisées. L'une d'elles est la pipette porte-œuf qui fixe l'ovule, et l'autre est la pipette d'injection que l'on injecte dans l'ovule après avoir capturé le sperme et l'avoir immobilisé. Ici, le taux de fécondation est plus élevé que la méthode de FIV puisque les spermatozoïdes sont libérés directement dans l’ovule.
Une fois le processus terminé, les œufs sont transférés dans un nouveau milieu et placés dans l’incubateur. Le contrôle de la fertilisation est effectué après 18 à 20 heures. Lors du contrôle de la fécondation, on s'attend à ce qu'il y ait 2 pronoyaux (noyaux), l'un provenant de l'ovule et l'autre provenant du sperme. Chaque œuf est évalué individuellement et toutes les caractéristiques observées sont notées. Une fois les œufs nettoyés, chaque ovocyte évalué est suivi étape par étape jusqu'à son transfert.
Les besoins nutritionnels naturels de l'embryon et la source à partir de laquelle il répond à ces besoins changent avec le temps. Pour y parvenir dans l’environnement extérieur au corps, différents médias sont utilisés à différentes périodes de développement.
Transfert d'embryons :
Chez les embryons dont la fécondation est contrôlée, on vérifie s'il y a division au 2ème jour. Si une division a eu lieu, la qualité de l'embryon est évaluée en examinant le nombre de cellules (blastomères), l'égalité des blastomères, le taux de fragmentation et certains autres paramètres. Le transfert d'embryons peut être effectué n'importe quel jour du 2ème au 5ème jour. La date du transfert est décidée en tenant compte de la qualité de l'embryon, du nombre d'embryons en développement, de l'âge de la patiente, de la réalisation ou non d'un diagnostic génétique. Dans notre centre, le transfert s'effectue généralement le 3ème jour. Cependant, dans les cas où la qualité des embryons est bonne, le nombre d'embryons élevé et l'âge de la patiente approprié, nous préférons transférer l'embryon à un stade ultérieur, à savoir le stade blastocyste, au 5ème jour afin d'éviter des grossesses multiples. Pendant le processus de transfert, la patiente est placée en position d'examen, puis les sécrétions appelées mucus dans le vagin et le col sont nettoyées avec des liquides de culture stériles. Les meilleurs embryons sont sélectionnés et placés dans l'utérus de la mère à l'aide d'un cathéter de transfert sous guidage échographique. Cette procédure est une procédure indolore à court terme. Des informations sont données sur l'état des embryons, et après un court repos, des informations sur les médicaments sont données et la patiente est renvoyée chez elle.
Éclosion assistée :
Il existe une structure membranaire en forme de coquille autour de l'embryon qui le protège, que nous appelons zone pellucide. Au cours du développement naturel, lorsque l'embryon atteint une certaine taille, cette membrane s'ouvre (éclosion) et l'embryon se fixe à la paroi interne de l'utérus. Cette membrane peut parfois être épaisse. Dans ce cas, il devient difficile pour l’embryon de s’attacher à la paroi interne de l’utérus. Pour réduire ce risque, la zone pellucide est amincie dans une certaine zone. Ce processus est appelé éclosion assistée. Des méthodes mécaniques, chimiques ou laser peuvent être utilisées. Dans notre centre, la méthode laser est utilisée pour le processus d'amincissement.
Congélation d'embryons :
S'il existe de nombreux embryons de haute qualité appartenant à la patiente autres que les embryons transférés, ils peuvent être congelés. En décongelant et en transférant les embryons congelés lors d'applications ultérieures, la femme n'a plus besoin d'un retraitement. À ce stade, la patiente ne reçoit que des médicaments qui préparent l'intérieur de l'utérus. Cela présente des avantages à la fois psychologiques et économiques. Les embryons décidés à être congelés sont progressivement équilibrés avec des produits chimiques appelés cryoprotecteurs pour éviter tout dommage pendant les processus de congélation et de décongélation. Deux méthodes peuvent être appliquées pour congeler des embryons.
1) Congélation lente
2)Congélation rapide (vitrification)
Une fois les embryons congelés, ils sont conservés dans de l’azote liquide à -196 °C jusqu’à décongélation. Étant donné que les cristaux de glace qui peuvent se former en raison du contenu liquide de l'embryon lors du refroidissement des embryons à une température de -196 degrés Celsius peuvent nuire à l'intégrité de l'embryon, le processus de refroidissement est effectué progressivement en utilisant des produits chimiques protecteurs dans la technique de congélation lente. Lors de la vitrification, une structure vitreuse ou vitreuse est créée dans laquelle les cristaux de glace ne se forment pas du tout, et les cellules sont congelées en les plongeant directement dans l'azote liquide. Lors de la décongélation d’embryons congelés, le processus inverse est appliqué, en utilisant des produits chimiques protecteurs spéciaux. Si l'on constate que les embryons décongelés continuent leur vitalité et grandissent, ils sont transférés. Les embryons peuvent être endommagés pendant les processus de congélation et de décongélation, mais pas pendant leur conservation dans l'azote liquide.